确诊单纯疱疹需要做体格检查、病毒培养和分离试验，以及血清学检测等。

一、体格检查

1.皮肤黏膜损害：单纯疱疹的典型皮损为局限性簇集性小水疱群，呈椭圆形或者不规则形，针尖至米粒大小，壁薄易破，外周有红晕。通常无明显全身症状或仅有低热、头痛、乏力、肌痛、腹股沟淋巴结肿大等症状；

2.口腔损害：常见于口唇及邻近部位，如鼻孔周围、上颚、牙龈等处，可表现为成簇的小水疱群，伴有灼烧感、刺痒感、疼痛不适等感觉。

二、病毒培养和分离试验

将标本接种在人胚肾细胞中，在35-36℃条件下培养4天，可见到典型的多核巨细胞包涵体，有助于诊断。

三、血清学检测

采用酶联免疫吸附法(ELISA)检测患者血清中的IgM抗体，可以辅助诊断该疾病。

此外，还可以通过PCR技术进行检测，即聚合酶链式反应，是一种分子生物学技术，其原理是利用特异引物对样本DNA片段进行扩增，并通过荧光定量分析来判断是否存在HSV感染的情况。